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10×膜蛋白A型上樣緩沖液
貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
PL130 |
10×膜蛋白A型上樣緩沖液 |
10×1 ml |
● 產品簡介
該產品配套動物膜蛋白提取試劑盒(貨號:RTD8111,RTD8112)和動物線粒體提取試劑盒(貨號:RTD8115,RTD8116)使用。產品含有甘油和G-250,為10倍濃度,使用時稀釋10倍使用。產品用于Blue-Native電泳上樣使用,不適用于其他系統(tǒng)(如Tris-甘氨酸系統(tǒng),Bis-Tris系統(tǒng),HEPES系統(tǒng),Tricine系統(tǒng)等)電泳。
● 貯存、效期和運輸:
-20℃貯存;一年有效;濕冰運輸。
● 使用方法:
1 膜蛋白BN非變性樣品處理:
1.1 建議使用50 μl膜蛋白重懸液(BN電泳用)(貨號:PN1020)重懸膜蛋白沉淀;
1.2 BCA方法測定蛋白濃度(貨號:RTP7102);
1.3 用膜蛋白重懸液(BN電泳用)調整蛋白濃度為1 μg/μl,按需分裝,每管50 μl,-80℃保存待用;
1.4 取一管50 μl樣品,溶化混勻后4℃ 16000 g 5分鐘,去除上清,保留沉淀;
1.5 沉淀中加入50 μl膜蛋白增溶液A(貨號:DM1080),輕柔重懸沉淀,盡量不產生氣泡,冰浴10分鐘;
1.6 4℃ 16000 g 15分鐘,取上清至一干凈1.5 ml離心管中即為增溶后膜蛋白溶液(小心不要吸取沉淀),此時得到的膜蛋白濃度為1 μg/μl,其中去垢劑DDM(n-Dodecyl β-D-maltoside,β-DM n-十二烷基-β-D-麥芽糖苷)終濃度為1%;
1.7 膜蛋白溶液中加入1/10體積10×膜蛋白A型上樣緩沖液(配套膜蛋白增溶液A使用)(貨號:PL130),使用BN凝膠電泳(貨號:RTD6139,RTD6140),每個泳道上樣5-20 μg。
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