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考馬斯亮藍(lán)蛋白染色液 常規(guī)法

考馬斯亮藍(lán)蛋白染色液 常規(guī)法

產(chǎn)品編號(hào):RTD6203

產(chǎn)品規(guī)格:250ml

數(shù)量
價(jià)格 ¥100

考馬斯亮藍(lán)染色液(常規(guī)法)

產(chǎn)品編號(hào)

規(guī)格

貯存

RTD6203

250ml

常溫

儲(chǔ)存條件

常溫保存,開(kāi)封后一年有效。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

考馬斯亮藍(lán)染色液(Commassie Blue Staining Solution)是以考馬斯亮藍(lán)G-250為主要成分,采用新配方配置而成??捎糜赟DS-PAGE或非變性PAGE膠(native gel)的染色。采用常規(guī)染色方法需至少1小時(shí)可以完成染色;采用快速染色方法數(shù)分鐘即可完成染色。本染色液經(jīng)過(guò)改良,不含有毒的甲醇,但含有刺激性氣味的乙酸。

使用說(shuō)明:

常規(guī)染色脫色方法

1.  電泳結(jié)束后,取凝膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。

2.  置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng),室溫染色1小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間。

    注:具體的染色時(shí)間取決于凝膠的厚度和染色時(shí)的溫度。凝膠較厚,溫度較低,則染色時(shí)間宜適當(dāng)延長(zhǎng)。凝膠較薄,溫度較高,則染色時(shí)間可以適當(dāng)縮短。通常染色至凝膠的顏色和染色液的顏色非常接近,在染色液中幾乎看不清凝膠時(shí),可以認(rèn)為已染色充分。染色2-4個(gè)小時(shí)或更長(zhǎng)時(shí)間不會(huì)對(duì)最終的染色效果產(chǎn)生負(fù)面影響。

3.  倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少2-3次。

4.  加入適量脫色液,確保脫色液可以充分覆蓋凝膠。

    注:脫色液可以使用考馬斯亮藍(lán)脫色液(RTD6204);如果希望自行配制,推薦的脫色液配方為:40%乙醇,10%乙酸,50%蒸餾水。

5.  置于水平搖床或側(cè)擺搖床上緩慢搖動(dòng),室溫脫色4-24小時(shí)。期間更換脫色液2-4次,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,并且蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。通常蛋白條帶在脫色1-2小時(shí)后即可出現(xiàn)。

注:脫色期間可以在脫色液中加入一片吸水紙,可以使部分染料吸附在吸水紙上,加快脫色。脫色時(shí)間過(guò)長(zhǎng)也會(huì)導(dǎo)致蛋白條帶的顏色變淺。

6. 完成脫色后,可以把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含20%甘油的水中。長(zhǎng)期保存可以制備干膠。

快速染色脫色方法

1.  電泳結(jié)束后,取膠放入適量考馬斯亮藍(lán)染色液中,微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。通常對(duì)于膠濃度大于10%的膠比較堅(jiān)韌,在發(fā)生煮沸時(shí)不易破損;對(duì)于膠濃度小于10%的膠,宜盡量避免煮沸,以免出現(xiàn)膠碎裂的情況。

2.  隨后在染色液溫度較高的情況下,在室溫?fù)u床上搖動(dòng)5-10分鐘。

3.  倒出染色液。染色液可以回收重復(fù)使用至少2-3次。

4.  加入適量脫色液,確保染色液可以充分覆蓋凝膠。

   注:脫色液可以使用考馬斯亮藍(lán)染色脫色液(RTD6204);如果希望自行配制,推薦的脫色液配方為:40%乙醇,10%乙酸,50%蒸餾水。

5.  微波爐加熱至接近沸騰或剛剛沸騰,立即停止加熱。

6.  隨后在脫色液溫度較高的情況下,在搖床上搖動(dòng)5-10分鐘。此時(shí)通??梢杂^(guān)察到比較清楚的蛋白條帶。

7.  更換新鮮的脫色液,重復(fù)步驟5和步驟6,直至藍(lán)色背景基本上全部被脫去,蛋白條帶染色效果達(dá)到預(yù)期。

8.  完成脫色后,可以把凝膠保存在水中,用于后續(xù)的拍照等。保存在水中的凝膠會(huì)發(fā)生溶漲。如需避免溶漲,可以把膠保存在含20%甘油的水中。長(zhǎng)期保存可以制備干膠。  


 
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