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2×Taq plus MasterMix 不含染料

2×Taq plus MasterMix 不含染料

產(chǎn)品編號:RTS3103-03

產(chǎn)品規(guī)格:5×500μl

數(shù)量
價格 ¥400



 2×Taq plus PCR MasterMix

 產(chǎn)品包裝:

 

 

目錄號

包裝

2×Taq plus MasterMix(不含染料)

RTS3103-02

500μl

RTS3103-03

5×500μl

2×Taq plus MasterMix(含染料)

RTS3104-02

500μl

RTS3104-03

5×500μl

注:以50μl PCR反應(yīng)體系為例,每次使用25μl 2×MasterMix500μl可做20 50μl PCR反應(yīng)。

 儲存條件: -20℃可長期保存;4℃穩(wěn)定貯存3個月。經(jīng)常使用時,一旦融化后請4℃貯存,盡量避免反復(fù)凍融。

 產(chǎn)品簡介:

本產(chǎn)品包含Taq plus DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR反應(yīng)的增強(qiáng)劑和優(yōu)化劑以及穩(wěn)定劑,濃度為2×。使用時,只需補(bǔ)加實驗所需的引物和模板后即可進(jìn)行PCR反應(yīng),可最大限度的減少人為誤差,具有快速簡便、穩(wěn)定性好等優(yōu)點。適用于常規(guī)PCR反應(yīng)、復(fù)雜模板(如GC含量高,有二級結(jié)構(gòu))的擴(kuò)增以及大規(guī)模基因檢測。使用該產(chǎn)品得到的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物末端含有一個A堿基,可以直接用于TA克隆。

 質(zhì)量控制:

經(jīng)檢測無外源核酸酶活性;PCR方法檢測無宿主殘余基因組DNA;能有效地擴(kuò)增人基因組中的單拷貝基因。

●  使用說明:

1. 冰浴中徹底融化2×MasterMix,混勻后Minispin將溶液收集到管底。

2. 按照下表在0.2ml PCR管中制備反應(yīng)體系:

 

50μl反應(yīng)體系

終濃度

2×MasterMix

25μl

上游引物 10μM

1-5μl

0.2-0.8 μM

下游引物 10μM

1-5μl

0.2-0.8 μM

模板

× μl

10pg-1μg

補(bǔ)至50μl

 

3. 快甩離心將反應(yīng)液收集到管底。

4. PCR儀如果沒有熱蓋加熱的話,補(bǔ)加25μl礦物油。

5. PCR儀上執(zhí)行以下程序:

步驟

溫度

時間

循環(huán)數(shù)

初始變性

94

5 min

1

變性

94

30 sec

25-40*

退火

Tm-5*

30 sec

延伸

72

1 min/kb

最后延伸

72

5 min

1

*注: PCR 反應(yīng)條件視模板、引物等的結(jié)構(gòu)條件不同而各異。在實際操作中需根據(jù)模板、目的片段的大小、堿基序列和引物的長短等具體情況,設(shè)定最佳的反應(yīng)條件(溫度、時間等)。

6. 電泳檢測。

 注:使用含染料的2×MasterMix可以直接上樣;不含染料的2×MasterMix要與6×loading buffer混合后上樣。

實驗示例:




 
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