DNase
I溶液（蛋白提取用）
DNase I
Solution（for protein isolation）
● 產(chǎn)品組成：
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貨號(hào)
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名稱
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規(guī)格
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RTT2103-01
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DNase I粉末
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10 KU
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RTT2103-02
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DNase I溶解液
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5 ml
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RTT2103-03
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1M MgCl2
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5 ml
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● 保存：-20℃粉末未配制有效期3年；DNaseI配制成溶液后-20℃有效期一年。
● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
脫氧核糖核酸酶Ⅰ(DNaseⅠ)是一種非特異性核酸酶切酶，可用于降解單鏈或雙鏈DNA，其原理為DNaseⅠ水解磷酸二酯鍵產(chǎn)生帶有5'-磷酸基團(tuán)和3'-OH的單核苷酸或寡核苷酸。 本產(chǎn)品能迅速水解核酸，降低粘度以減少處理時(shí)間和增加蛋白產(chǎn)量。該酶可以與細(xì)菌蛋白提取液和RIPA 裂解液等蛋白抽提試劑配合使用。
本產(chǎn)品RNase活性未檢測(cè)，不能用于反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)（RT-PCR）中DNA的去除使用。RT-PCR中DNA污染的去除請(qǐng)選擇RNase-free DNase
I（貨號(hào)：RTT2014）。
● 活性定義：
One unit of the enzyme
completely degrades 1 μg of DNA in 10 min at37°C.
● DNaseI溶解液組份：
20
mMsodium acetate pH 6.5, containing5 mMCaCl2 and 0.1 PMSF, 50% (v/v) glycerol
● DNaseI失活或抑制：
加入EDTA至終濃度為2.5mM后，65℃加熱10分鐘可使DNase I失活。酚氯仿抽提也可以使DNase I失活。金屬離子螯合劑，達(dá)到毫摩爾/升濃度的鋅離子，0.1%的SDS，DTT、巰基乙醇等還原劑，50-100mM以上鹽濃度均對(duì)DNase I有顯著抑制作用。
● 使用方法：
1、DNase I溶液的配制：取5ml DNase I溶解液全部加到DNase I粉末中，充分混勻，配成濃度為2000U/ml DNase I溶液。-20℃貯存。
2、蛋白提取液中按照1/100 體積加入DNase I溶液（使其終濃度為20U/ml），1/100體積加入1MMgCl2，37℃處理30-60分鐘。
注：由于EDTA能螯合酶活性需要的Ca2+和Mg2+，蛋白初始裂解液中要去除EDTA，否則會(huì)降低DNase的消化能力。
3、繼續(xù)后續(xù)蛋白提取實(shí)驗(yàn)。